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특수염색

특수염색 Special Stain

  • 병리학적 변화 과정을 증명하기 위해 다양한 특수 염색법이 사용되고 있습니다. 이 염색기술에는 특정 조직의 구성요소에 대한 친화성을 갖는 염료 또는 화학물질을 일반적으로 사용합니다. 특수염색 중 흔하게 사용되고 있는 염색법은 아래와 같습니다. 이외에도 다양한 특수염색법이 사용되고 있습니다. 또한 특수염색을 위해서는 조직검체의 전처리 등이 중요하므로 사전에 연락주시면 상세히 알려드리겠습니다.
  • Masson’s Trichrome stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Massons Trichrome 염색은 피부, 심장, 근육 등의 조직에서 콜라겐 기질(교원섬유)을 확인하는 데 사용됩니다. Collagen은 다양한 장기에서 내부 구조를 지지하는 역할을 합니다.
    • Trichrome 염색을 통해 세포와 주변 결합조직을 구별할 수 있는 데 이것을 평가하면 조직 손상의 패턴을 판정하는 데 도움이 됩니다(예, 간경변cirrhosis이 있는 경우 collagen이 증가).
    • 또한 trichrome 염색은 여러 기관의 결합조직 피막, 위장관의 고유판, 폐의 기관지혈관 구조와 같은 정상적인 구조를 식별하는 데에도 도움이 됩니다.
    Masson's Trichrome stain
    • Nuclei: black
    • Cytoplasm, keratin, muscle fibers: red/pink
    • Collagen, mucin: blue
  • Verhoff’s Elastic Stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • 근동맥의 탄력판과 대동맥의 중막에는 탄력섬유가 포함되어 있기 때문에 elastic stain은 동맥의 윤곽을 확인하는데 도움이 됩니다. 탄성섬유 염색시 van Gieson 용액은 우수한 대비를 제공합니다.
    • Verhoeff Van Gieson/Elastica van Gieson, EVG 염색은 탄력조직의 위축이 나타나는 폐기종이나 동맥경화 등 다양한 혈관질환을 평가하는데 유용합니다.
    Verhoff’s Elastic Stain
    • Nuclei: dark brown
    • Elastic fiber: black
    • Collagenic fiber: red
    • Muscle: yellow
  • Reticulin Stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Reticulin Stain은 조직 절편에서 세망 섬유(reticulin fiber) 식별을 위해 활용되는 우수한 염색입니다. Reticulin은 구조적 완전성을 제공하는 III형 콜라겐이며 많은 기관(즉, 간, 신장, 비장)의 기저막에서 발견됩니다.
    • Reticulin 염색은 암종 및 육종과 같은 특정 유형의 종양 감별 진단에 유용하며 신생물의 성장패턴을 확인하는 데에도 도움이 됩니다.
    Reticulin Stain
    • Nuclei: gray
    • Reticulin fiber: black
    • Collagenic fiber: dark gray - purple
  • Phosphotungstic acid-hematoxylin(PTAH) stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Phosphotungstic acid-hematoxylin(PTAH) 염색은 connective tissue(collagen, striated muscle, astrocytes 등)의 조직 시각화에 활용됩니다.
    Phosphotungstic acid-hematoxylin(PTAH) stain
    • Striated muscle, nuclei, mitochondria, astrocytes: blue
    • Collagenic fiber: orange
  • Colloidal iron (“AMP”)
    의의 및 적용 Image Staining result
    • 다가 콜로이드상 철입자와 탄수화물내 산성기의 이온 결합에 이용한 염색법입니다. 염화제2철을 사용하여 산성점액 다당류에 Fe3+를 결합시킨 후 Prussian blue 반을을 이용하여 간접적으로 산성점액다당류를 검출하는 방법입니다.
    • 검체조직의 결합조직점액을 hyaluronidase로 전처리하면 점액의 hyaluronic acid가 제거되어 특이성이 높은 결과를 얻을 수 있습니다.
    Colloidal iron (“AMP”)
    • Acid mucopolysaccharides and sialomucins: deep blue
    • Nuclei: pink-red
    • Cytoplasm: pink
    • Counterstain: Nuclear-fast red
  • Alcian blue stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Alcian blue는 산성점액물질에 대한 특이성, 강한 염색성, 염색의 불용성 그리고 영구적으로 안정된 염색성을 얻을 수 있어 다양한 산성점액물질의 검출에 일반적으로 사용되고 있습니다. pH를 조정하여 carboxyl group와 sulfate group을 가진 산성점액물질을 구분할 수도 있습니다.
    • pH 2.5에서는 carboxyl group와 sulfate group에 모두 결합하나 pH1에서는 sulfate group에만 결합하며, 비만세포(mast cell)에 함유된 heparin도 pH1에서 양성반응을 보입니다.
    Alcian blue stain
    • Acidic Sulfated Mucosubstances: blue
    • Hyaluronic Acid: blue
    • Sialomucins: blue
    • Nuclei: red
    • Background: pink
  • Periodic Acid-Schiff (PAS) stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • PAS(Periodic-Acid Schiff) 염색은 다당류, 뮤신, 글리코겐 및 곰팡이의 세포벽 성분과 같은 탄수화물 및 탄수화물 화합물의 존재를 입증하기 위해 조직학 연구에 사용되고 있습니다. PAS 염색은 골격근, 간, 심장 근육과 같은 조직에서 글리코겐을 검출하는 데 사용됩니다.
    • PAS 반응은 일부 다당류가 과요오드산(periodic acid)과 반응하여 aldehyde를 생성하는 산화 과정으로 시작되며, 생성된 알데히드는 무색의 Schiffs fuchsin과 반응하여 빨간색 혹은 분홍색 혹은 자홍색으로 나타납니다.
    • Hematoxylin 또는 methyl green은 핵을 염색하는 데 사용됩니다.
    • Glycogen과 mucin을 염색하지만 조직의 glycogen을 제거하기 위해 diastase로 미리 소화시킬 수도 있습니다(diastase-PAS stain).
    Periodic Acid-Schiff (PAS) stain
    • Neutral mucin and PAS positive: red or pink or magenta
    • Nuclei: black
  • Mucicarmine stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Mucicarmine 염색은 상피 기원의 mucin 검출에 있어 매우 특이적입니다.
    • 편평 세포 암종과 선암종을 구별하여 식별하는 데 사용되는 데 위장관에서 기원하는 선암을 감지하는 데 특히 유용합니다.
    • 이 염색에서는 중성염색다당류와 강산성의 황산화 점액다당류는 음성(또는 약산성), 약산성의 carboxylated mucopolysaccaharide는 양성을 나타냅니다.
    Mucicarmine stain
    • Mucosubstances: rose to red
    • Nuclei: black
  • Fontana-Masson for Melanin
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Fontana-Masson 염색은 피부, 모발, 망막 또는 홍채 및 중추신경계의 일부에서 발견되는 멜라닌과 일반적으로 위와 소장에서 발견되는 argentaffin 과립을 식별하는 데 사용합니다.
    • 조직 내 환원성기에 의해 ammoniacal silver nitrate(암모니아성 질산은 이온)가 환원되면 갈색 혹은 흑색의 콜로이드성 금속성 은이온으로 전환됩니다. 그러나 이 염색법에서는 argentaffin, chromaffin과 일부 some lipochrome pigments도 검은색으로 염색됩니다.
    Fontana-Masson for Melanin
    • Melanin, argentaffin, chromaffin: black
    • Nuclei: pink red
    • Cytoplasm: pale pink
    • Counter stain(nuclear fast red):
  • Melanin Bleach
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Melanin Bleach는 세포 형태를 잘 보기 위해 멜라닌을 제거하는 것입니다.
    • 이 방법은 potassium permanganate 또는 hydrogen peroxide와 같은 강력한 산화제를 사용합니다. 눈(Ocular)의 멜라닌은 표백하는 데 몇 시간이 걸리는 반면 피부(skin)의 멜라닌은 몇 분이 걸립니다. 특히 면역조직화학 검사에서 melanin bleach를 시행하는 것은 판독간섭을 줄이는 데에 중요합니다.
    Melanin Bleach
  • Iron Stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Iron Stain은 조직에서 철분을 입증하는 고전적인 방법입니다. 조직절편을 묽은 염산으로 처리하여 결합 단백질에서 철 이온을 방출시킵니다. 그다음 potassium ferrocyanide와 반응하여 불용성 청색 화합물을 생성합니다(Prussian blue reaction). 골수검체의 경우 수은 고정제가 포르말린보다 철분을 더 잘 보존하는 것으로 알려져 있습니다.
    Iron Stain
    • Iron: Bright blue
    • Nuclei: red
    • Backgroud: pink
    • Counter stain(nuclear fast red):
  • von Kossa Stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Von Kossa Stain(Calcium Stain)은 파라핀 절편에서 칼슘 침전물을 조직학적으로 시각화하기 위해 사용하고 있습니다. 이 방법은 칼슘 자체에 특이적인 것이 아니라 조직을 질산은 용액으로 처리하고 강한 빛에 의해 환원된 칼슘을 대체하여 은을 침착시키므로 금속성 은으로 가시화될 수 있습니다.
    von Kossa Stain
    • Calcium salts: black to brown black
    • Nuclei: red
    • Cytoplasm: pink
    • Counter stain(nuclear fast red):
  • Oil red O stain
    의의 및 적용 Image Staining result
    • Oil red O stain(lipid stain)은 조직에서 중성 지질과 지방산을 식별합니다. 알코올이 포함된 fixative 또는 xylene을 이용한 투명과정에서 지질이 제거되기 때문에 cryostat(냉동절편)를 이용한 절편이 필요합니다. 폐 조직에서 지방색전이나 말초 혈액의 응고절편을 식별하는 데 유용할 수 있습니다.
    Oil red O stain
    • Fat cells: red
    • Neutral fat: red
    • Nuclei: blue

동물실험 연구지원센터, DK KOREA

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